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News Center流式細(xì)胞術(shù)評價(jià)腫瘤化療療效的作用流式細(xì)胞術(shù)不僅可對惡性腫瘤DNA含量進(jìn)行分析,還可根據(jù)化療過程中的腫瘤DNA分布組方圖的變化去評估療效,了解細(xì)胞動(dòng)力學(xué)變化,對腫瘤化療具有重要的意義。過去傳統(tǒng)的3H-胸腺嘧啶核苷酸放射自顯影計(jì)數(shù)標(biāo)記指數(shù)的方法,由于費(fèi)時(shí)、工序復(fù)雜等原因,不能適應(yīng)臨床大量標(biāo)本的測定。流式細(xì)胞術(shù)可快速分析,并有程序化的計(jì)算機(jī)快速計(jì)算出各時(shí)相的百分比率,顯示出腫瘤細(xì)胞群體的增殖能力。特別是近年來發(fā)展起來的DNA-Brdu摻入技術(shù)和抗Brdu的單抗熒光免疫技術(shù)在流式技術(shù)...
石蠟包埋組織單細(xì)胞樣品制備方法存在的問題石蠟包埋組織單細(xì)胞制備方法的建立,使流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤研究中得到更加廣泛的應(yīng)用。主要存在如下問題。1、樣品中的碎片較多,所獲得的DNA組方圖質(zhì)量不及新鮮組織好,組方圖的細(xì)胞峰較寬,細(xì)胞峰CV值較大。2、異倍體率較少。由于組方圖的細(xì)胞峰CV值增大,一些接近于二倍體的DNA異倍體峰位被掩蓋。3、S期細(xì)胞百分比不如新鮮組織的S期計(jì)算準(zhǔn)確,百分比計(jì)數(shù)往往偏高,這仍然與細(xì)胞峰增寬有關(guān)。4、DNA二倍體標(biāo)準(zhǔn)不穩(wěn)定。在石蠟包埋腫瘤DNA倍體分析研究中,...
兔ELISA試劑盒盡量保持室溫20-25℃,避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發(fā)。適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,不要在陽光直射下實(shí)驗(yàn),防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間,如果工作臺溫度過低,應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料,水質(zhì)量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水,不要使用過期的兔ELISA試劑盒,加入樣品或者試劑到空的微孔板時(shí),吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。孵育時(shí)間的計(jì)算越規(guī)范越好,兔ELISA試劑盒保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性,先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加...
免疫和腫瘤胞測定及分選中的應(yīng)用細(xì)胞分選是FCM技術(shù)一項(xiàng)特殊的功能,在免疫研究及臨床應(yīng)用上占有重要地位。它的主要作用一是分選,二是鑒定,而分選又必須同鑒定結(jié)合進(jìn)行。只要有相應(yīng)的熒光標(biāo)記,就可以分離出任何所需要的細(xì)胞群體,尤其是含量但對鑒定又非常主要的細(xì)胞,純度可達(dá)95%以上。細(xì)胞周期中靜止期細(xì)胞的分離R.Schwarting等制備一株抗核抗原的單克隆抗體Ki-67,它同細(xì)胞周期中G1、S、G2M期所有具增殖性的細(xì)胞結(jié)合,但不同G0期細(xì)胞反應(yīng),這樣就可以用分選技術(shù)把靜止期細(xì)胞分離...
細(xì)胞膜的流動(dòng)性或微粘度膜的流動(dòng)性或者微粘度,可以通過測量結(jié)合到膜雙分子層中的疏水熒光探針的熒光偏振來研究。因?yàn)闊晒夥肿游掌窆獾膸茁屎桶l(fā)射熒光的偏振度與熒光分子相對于激發(fā)光偏振面的空間取向有關(guān)。若以線偏振光激發(fā)隨機(jī)取向的熒光分子,那么,與激發(fā)光偏振面取向一致的那些熒光分子具有zui大的吸收。由于多數(shù)熒光分子的激發(fā)太壽命是幾毫微秒的數(shù)量級,已經(jīng)吸收了偏振光的一部份熒光分子,到它們發(fā)射熒光時(shí),已經(jīng)偏離開它們的原始取向,使得發(fā)射出熒光偏振面的方向?qū)l(fā)生變化。若用兩個(gè)互相垂直的偏振...
抗體和其它分子的共價(jià)標(biāo)記以共價(jià)鍵結(jié)合的熒光染料FITC既能標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)總蛋白、又能更廣泛地標(biāo)記各種特異性配體。這些配體是能與不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)很強(qiáng)很特異地結(jié)合的各種大分子和小分子,如蛋白、多聚核苷酸、脂類以及其他生物分子、被標(biāo)記的特異性配體能夠探測很多種細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的參量。例如:被標(biāo)記的外源凝集素可檢測細(xì)胞表面糖;被標(biāo)記的抗體可檢測表面抗原;被標(biāo)記的多聚陽離子可檢測表面電荷,被標(biāo)記的激素、生長因子、神經(jīng)遞質(zhì)和病毒等可以檢測細(xì)胞受體;被標(biāo)記的大分子、微生物或者塑料微球可檢測細(xì)胞內(nèi)吞...
Gram-Twort革蘭染色液產(chǎn)品簡介:革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生ChristainGram于1884年所發(fā)明,是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復(fù)染法。未經(jīng)染色的細(xì)菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,用以分類鑒定。通過此法染色可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌(G)和革蘭+陰性菌(G)兩大類。細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)...
熒光測量熒光信號是由對細(xì)胞進(jìn)行染色的特異性熒光染料受激后發(fā)射的。熒光波長與激發(fā)光波長不同且強(qiáng)度較弱,為此就要使用濾片以濾除非熒光信號并使用靈敏的探測器。下面我們將分別進(jìn)行討論。光源常用的光源有弧光燈和激光?;」鉄舻慕Y(jié)構(gòu)簡單、價(jià)格便宜、維修容易,但在單一譜線上的功率較弱。激光單色性好、功率強(qiáng)大、不易散焦,但結(jié)構(gòu)復(fù)雜、價(jià)格昂貴、維修困難。至于選擇某種光源的某條譜線做為激發(fā)光源,主要是依據(jù)被激發(fā)的物質(zhì),例如細(xì)胞的自身熒光物質(zhì)或熒光染料的激發(fā)光譜而定。光源的譜線愈接近被激發(fā)物質(zhì)的激發(fā)...