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豬ELISA試劑盒的操作步驟是怎樣的?

更新時間:2015-08-19點擊次數(shù):1248
豬ELISA試劑盒的ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本方法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。
 
在使用豬ELISA試劑盒之前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內,立即加入50ul的生物素標記的抗體。
 
甩去豬ELISA試劑盒的孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去豬ELISA試劑盒的孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次后,如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。