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化學試劑
常用化學試劑
50T;10*50TBCA蛋白濃度測定試劑盒
BCA蛋白濃度測定試劑盒
品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號 | PC0020 |
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規(guī)格 | 50T;10*50T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研實驗 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
基本信息
英文名稱
BCA Protein Assay Kit
中文名稱
BCA蛋白濃度測定試劑盒
規(guī)格
50T(500微孔) ; 10*50T(500微孔)
儲存條件
BSA附件-20℃,其它試劑RT,有效期1年
產(chǎn)品簡介:
堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡(luò)合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測結(jié)果,但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
操作說明:
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液:根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取10μL BSA標準品用PBS稀釋至100μL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。將標準品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足至20μL。
3. 將樣品作適當稀釋(最好多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
BCA蛋白濃度測定試劑盒4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分鐘。用酶標儀測定A562nm,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
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